Gen de resistència al carbapenem (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nom del producte
HWTS-OT045 Kit de detecció del gen de resistència al carbapenem (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR de fluorescència)
Epidemiologia
Els antibiòtics carbapenem són antibiòtics β-lactàmics atípics amb l'espectre antibacterià més ampli i una activitat antibacteriana més forta.Per la seva estabilitat a la β-lactamasa i la seva baixa toxicitat, s'ha convertit en un dels fàrmacs antibacterians més importants per al tractament d'infeccions bacterianes greus.Els carbapenems són altament estables a les β-lactamases d'espectre estès (ESBL), els cromosomes i les cefalosporinases mediades per plasmidis (enzims AmpC).
Canal
| PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Control intern | Control intern |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Paràmetres tècnics
| Emmagatzematge | ≤-18 ℃ |
| Vida útil | 12 mesos |
| Tipus d'exemplar | Esput, colònies pures, hisop rectal |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103CFU/ml |
| Especificitat | a) El kit detecta les referències negatives normalitzades de l'empresa, i els resultats compleixen els requisits de les referències corresponents. b) Els resultats de la prova de reactivitat creuada mostren que aquest kit no té cap reacció creuada amb altres patògens respiratoris, com ara Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella, Acinetobacter baumannii, Ha. junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, Adenovirus respiratori, Enterococcus o mostres que contenen altres gens resistents als fàrmacs CTX, mecA, SME, SHV, etc. c) Antiinterferències: per a la prova d'interferència es seleccionen mucina, minociclina, gentamicina, clindamicina, imipenem, cefoperazona, meropenem, clorhidrat de ciprofloxacina, levofloxacina, àcid clavulànic, roxitromicina i els resultats mostren que les substàncies interferents esmentades anteriorment no tenen cap reacció interferent. a la detecció de gens de resistència a carbapenems KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM i IMP. |
| Instruments aplicables | Sistemes de PCR en temps real Applied Biosystems 7500 Sistemes de PCR en temps real QuantStudio®5 Sistemes de PCR en temps real SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Sistema PCR en temps real LightCycler®480 Sistema de detecció de PCR en temps real LineGene 9600 Plus (FQD-96A,HangzhouTecnologia Bioer) Ciclador tèrmic quantitatiu en temps real MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Sistema de PCR en temps real BioRad CFX96 Sistema de PCR en temps real BioRad CFX Opus 96 |
Flux de treball
Opció 1.
Reactiu d'extracció recomanat: Macro i Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-301)9-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (que es pot utilitzar amb l'extractor automàtic d'àcids nucleics Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) de Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Afegiu 200μL de solució salina normal a precipitat del tal.Els passos posteriors han de seguir les instruccions per a l'extracció i el volum d'elució recomanat és100μl.
Opció 2.
Reactiu d'extracció recomanat: Reactiu d'extracció o purificació d'àcids nucleics (YDP302) de Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. L'extracció s'ha de començar d'acord amb el pas 2 de les instruccions d'ús (afegiu 200 μL de tampó GA al precipitat de tal. , i agiteu fins que el tall estigui completament suspès).Utilitzeu l'aigua lliure de RNasa/DNasa per a l'elució i el volum d'elució recomanat és de 100 μL.
Opció 3.
Reactiu d'extracció recomanat: Reactiu d'alliberament de mostres de macro i microtest.La mostra d'esput s'ha de rentar afegint 1 ml de solució salina normal al precipitat de tall tractat esmentat anteriorment, centrifugat a 13.000 r/min durant 5 minuts i el sobrenedant es descarta (mantingueu 10-20 µL de sobrenedant).Per a una colònia pura i un hisop rectal, afegiu 50 μL de reactiu d'alliberament de la mostra directament al precipitat de tall tractat esmentat anteriorment, i els passos posteriors s'han d'extreure segons les instruccions d'ús.
