Gen de resistència als carbapenèmics (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nom del producte
Kit de detecció del gen de resistència als carbapenems HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR de fluorescència)
Epidemiologia
Els antibiòtics carbapenèmics són antibiòtics β-lactàmics atípics amb l'espectre antibacterià més ampli i la major activitat antibacteriana. A causa de la seva estabilitat a la β-lactamasa i la seva baixa toxicitat, s'ha convertit en un dels fàrmacs antibacterians més importants per al tractament d'infeccions bacterianes greus. Els carbapenèmics són altament estables a les β-lactamases d'espectre ampliat (BLEE) mediades per plasmidis, cromosomes i cefalosporinases mediades per plasmidis (enzims AmpC).
Canal
| PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Control Intern | Control Intern |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Paràmetres tècnics
| Emmagatzematge | ≤-18 ℃ |
| Vida útil | 12 mesos |
| Tipus de mostra | Esput, colònies pures, hisop rectal |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| Nivell de Detecció | 103UFC/mL |
| Especificitat | a) El kit detecta les referències negatives estandarditzades de l'empresa i els resultats compleixen els requisits de les referències corresponents. b) Els resultats de la prova de reactivitat creuada mostren que aquest kit no té cap reacció creuada amb altres patògens respiratoris, com ara Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, adenovirus respiratori, Enterococcus, o mostres que contenen altres gens resistents a fàrmacs CTX, mecA, SME, SHV, TEM, etc. c) Antiinterferència: Mucina, minociclina, gentamicina, clindamicina, imipenem, cefoperazona, meropenem, clorhidrat de ciprofloxacina, levofloxacina, àcid clavulànic i roxitromicina es seleccionen per a la prova d'interferència, i els resultats mostren que les substàncies interferents esmentades anteriorment no tenen cap reacció interferent a la detecció dels gens de resistència als carbapenems KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM i IMP. |
| Instruments aplicables | Sistemes de PCR en temps real Applied Biosystems 7500 Sistemes de PCR en temps real QuantStudio®5 Sistemes de PCR en temps real SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Sistema de PCR en temps real LightCycler®480 Sistema de detecció de PCR en temps real LineGene 9600 Plus (FQD-96A，HangzhouTecnologia bioer) Termociclador quantitatiu en temps real MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Sistema de PCR en temps real BioRad CFX96 Sistema de PCR en temps real BioRad CFX Opus 96 |
Flux de treball
Opció 1.
Reactiu d'extracció recomanat: Kit general d'ADN/ARN Macro i Micro-Test (HWTS-301)9-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (que es pot utilitzar amb l'extractor automàtic d'àcids nucleics Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) de Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Afegiu 200 μL de solució salina normal al precipitat de tal·lus. Els passos posteriors han de seguir les instruccions per a l'extracció i el volum d'elució recomanat és100 μL.
Opció 2.
Reactiu d'extracció recomanat: Reactiu d'extracció o purificació d'àcids nucleics (YDP302) de Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. L'extracció s'ha de començar estrictament d'acord amb el pas 2 de les instruccions d'ús (afegiu 200 μL de tampó GA al precipitat del tal·lus i agiteu fins que el tal·lus estigui completament suspès). Utilitzeu aigua lliure de RNasa/DNasa per a l'elució, i el volum d'elució recomanat és de 100 μL.
Opció 3.
Reactiu d'extracció recomanat: Reactiu d'alliberament de mostres Macro & Micro-Test. Cal rentar la mostra d'esput afegint 1 ml de solució salina normal al precipitat de tal·lus tractat esmentat anteriorment, centrifugar a 13000 r/min durant 5 minuts i descartar el sobrenedant (conservar 10-20 µL de sobrenedant). Per a colònies pures i hisop rectal, afegir 50 μL de reactiu d'alliberament de mostra directament al precipitat de tal·lus tractat esmentat anteriorment i extreure els passos següents segons les instruccions d'ús.
