Una nova arma per al diagnòstic de la tuberculosi i la detecció de la resistència als fàrmacs: una seqüenciació dirigida a la nova generació (TNG) combinada amb l’aprenentatge automàtic per al diagnòstic d’hipersensibilitat de la tuberculosi
Informe de literatura: CCA: un model de diagnòstic basat en TNG i aprenentatge automàtic, adequat per a persones amb menys tuberculosi bacteriana i meningitis tuberculosa.
Títol de la tesi: seqüenciació de la nova generació i aprenentatge de màquines orientades a la tubercul: una estratègia de diagnòstic ultra-sensible per a tubulars pulmonars paucífics i meningitis tubular.
Periòdic: 《Clinica Chimica Acta》
Si : 6.5
Data de publicació: gener de 2024
Combinat amb la Universitat de l'Acadèmia de Ciències de la Universitat de Ciències i Beijing Hospital de la Universitat Mèdica de Capital Medical, Macro & Micro-Test va establir un model de diagnòstic de tuberculosi basat en la nova generació de tecnologia de seqüenciació dirigida (TNGS) i mètode d'aprenentatge automàtic, que va proporcionar un alt alt nivell La sensibilitat a la detecció de la tuberculosi amb pocs bacteris i meningitis tuberculosa, va proporcionar un nou mètode de diagnòstic d’hipersensibilitat per al diagnòstic clínic de dos tipus de tuberculosi i van ajudar al diagnòstic precís, la detecció de la resistència als fàrmacs i el tractament de la tuberculosi. Al mateix temps, es troba que l’ADNc plasmàtic del pacient es pot utilitzar com a tipus de mostra adequat per al mostreig clínic en el diagnòstic de TBM.
En aquest estudi, es van utilitzar 227 mostres de plasma i mostres de líquids cefalorraquidi per establir dues cohorts clíniques, en què es van utilitzar les mostres de cohort de diagnòstic de laboratori per establir el model d'aprenentatge automàtic del diagnòstic de tuberculosi i es van utilitzar les mostres de cohort clínica per verificar els establerts establerts en aquest diagnòstic de diagnòstic. Model de diagnòstic. Totes les mostres es van orientar per primera vegada amb un conjunt de sondes de captura dirigida especialment dissenyada per a Mycobacterium tuberculosis. A continuació, basant-se en dades de seqüenciació de TB-TNGS, el model de l’arbre de decisió s’utilitza per realitzar una validació creuada de 5 vegades en els conjunts de formació i validació de la cua de diagnòstic de laboratori i s’obtenen els llindars de diagnòstic de mostres de plasma i mostres de líquids cerebridi. El llindar obtingut es incorpora en dos conjunts de proves de cua de diagnòstic clínic per a la detecció i el rendiment diagnòstic de l’aprenent s’avalua mitjançant la corba ROC. Finalment, es va obtenir el model de diagnòstic de tuberculosi.
Fig. 1 Esquema esquemàtic del disseny de la investigació
Resultats: Segons els llindars específics de la mostra d’ADN CSF (AUC = 0,974) i la mostra de l’ADNc plasmàtic (AUC = 0,908) determinades en aquest estudi, entre 227 mostres, la sensibilitat de la mostra de CSF va ser del 97,01%, l’especificitat va ser del 95,65%i La sensibilitat i l’especificitat de la mostra de plasma van ser del 82,61% i del 86,36%. En l'anàlisi de 44 mostres aparellades de CFDNA plasmàtica i ADN de fluids cefalorraquidi a partir de pacients amb TBM, l'estratègia diagnòstica d'aquest estudi té una alta consistència del 90,91% (40/44) en CFDNA plasmàtic i l'ADN de fluids cerebrospinals i la sensibilitat és del 95,45% del plasma i el fluid cerebrospinal és del 95,45% (42/44). En nens amb tuberculosi pulmonar, l’estratègia de diagnòstic d’aquest estudi és més sensible a les mostres de plasma que els resultats de detecció XPERT de mostres de sucs de sucs gàstrics dels mateixos pacients (28,57% vs 15,38%).
Fig. 2 Anàlisi Rendiment del model de diagnòstic de la tuberculosi per a mostres de població
Fig. 3 Resultats diagnòstics de mostres aparellades
Conclusió: Es va establir un mètode de diagnòstic hipersensible per a la tuberculosi en aquest estudi, que pot proporcionar una eina de diagnòstic amb la major sensibilitat de detecció per a pacients clínics amb tuberculosi oligobacil·lar (cultiu negatiu). La detecció de tuberculosi hipersensible basada en l’ADNc plasmàtic pot ser un tipus de mostra adequat per al diagnòstic de tuberculosi activa i meningitis tuberculosa (les mostres de plasma són més fàcils de recollir que el líquid cerebrospinal per a pacients sospitosos de tuberculosi cerebral).
Enllaç original: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/s0009898123004990? via%3dihub
Introducció breu de productes de detecció de sèries de tuberculosi macro i micro-test
A la vista de la complicada situació de mostra de pacients amb tuberculosi i diverses necessitats, Macro & Micro-Test proporciona un conjunt complet de solucions NGS per a l'extracció de liquidació de mostres d'esput, construcció i seqüenciació de la biblioteca Qualcomm i anàlisi de dades. Els productes cobreixen el diagnòstic ràpid de pacients amb tuberculosi, detecció de la resistència als fàrmacs de la tuberculosi, la tipificació de la tuberculosi de Mycobacterium i la NTM, el diagnòstic d’hipersensibilitat de la tuberculosi negativa dels bacteris i les persones tuberculoses, etc.
Kits de detecció en sèrie per a la tuberculosi i els micobacteris:
Article No | Nom del producte | Contingut de proves de producte | Tipus de mostra | Model aplicable |
HWTS-3012 | Agent de llançament de mostra | S'utilitza en el tractament de liquidació de mostres d'esput, ha obtingut un número de registre de primera classe, Sutong Machinery Equipment 20230047. | esput | |
HWTS-NGS-P00021 | Kit de detecció de quantitats Qualcomm per a la tuberculosi hipersensible (mètode de captura de sondes) | Detecció d’hipersensibilitat no invasiva (biòpsia líquida) per a la tuberculosi pulmonar negativa i els nòduls cerebrals; Les mostres de persones que se sospitaven que estaven infectades amb tuberculosi o no tuberculosi micobacteris es van analitzar per metagenòmica de seqüenciació de gran profund es van proporcionar. | Sang perifèrica, líquid de rentat alveolar, hidrotòrax i ascites, la mostra de punció de focus, líquid cefaloraquidi. | Segona generació |
HWTS-NGS-T001 | Tipus de micobacterium i kit de detecció de resistència als fàrmacs (mètode de seqüenciació d'amplificació multiplex) | Prova d'escriptura de Mycobacterium, inclòs MTBC i 187 NTM;Detecció de resistència als fàrmacs de Mycobacterium tuberculosis cobreix 13 fàrmacs i 16 llocs de mutació bàsica dels gens de resistència al fàrmac. | Esput, líquid de rentat alveolar, hidrotòrax i ascites, la mostra de punció de focus, líquid cefaloraquidi. | Plataforma Dual de segona/tercera generació |
Destaquen: HWTS-NGS-T001 Mycobacterium Typing i Kit de detecció de resistència als fàrmacs (mètode d'amplificació multiplex)
Introducció del producte
El producte es basa en els principals fàrmacs de primera i segona línia descrits a les directrius de tractament TB de TB, macròlids i aminoglicòsids que s’utilitzen habitualment en les directrius de tractament amb NTM i els llocs de resistència als fàrmacs cobreixen tot un grup de llocs relacionats amb la resistència als fàrmacs al Qui el catàleg de mutació del complex complex de Mycobacterium tuberculosis, així com altres gens de resistència als fàrmacs i llocs de mutació segons la investigació i les estadístiques de Literatures de gran puntuació a casa i a l'estranger.
La identificació d'escriure es basa en les soques NTM resumides en les directrius NTM publicades per la revista xinesa de tuberculosi i malalties respiratòries i el consens d'experts. Els primers imprimits de mecanografia dissenyats poden amplificar, seqüenciar i anotar més de 190 espècies NTM.
Mitjançant la tecnologia d’amplificació de PCR múltiple dirigida, els gens genotipats i els gens resistents als fàrmacs de Mycobacterium es van amplificar mitjançant PCR multiplex i es va obtenir la combinació d’amplicons de gens diana a detectar. Els productes amplificats es poden construir en biblioteques de seqüenciació de segona generació o de tercera generació i totes les plataformes de seqüenciació de segona generació i tercera generació es poden sotmetre a seqüenciació de gran profunditat per obtenir la informació de seqüència dels gens objectiu. En comparar amb les mutacions conegudes contingudes a la base de dades de referència integrada (incloent el catàleg de mutació del complex Mycobacterium tuberculosis i la seva relació amb la resistència al fàrmac), es van determinar les mutacions relacionades amb la resistència als fàrmacs o la susceptibilitat dels medicaments contra la tuberculosi. Combinat amb la solució de tractament de mostres de mostra d’esput autoobrida de macro i micro-test, es va resoldre el problema de la baixa eficiència d’amplificació d’àcids nucleics de les mostres d’esput clínic (deu vegades superior al dels mètodes tradicionals), de manera que la detecció de seqüenciació de resistència als fàrmacs pot ser S’aplica directament a mostres d’esput clínic.
Gamma de detecció de productes
34gens relacionats amb la resistència als fàrmacs18fàrmacs anti-tuberculosi i6Es van detectar fàrmacs NTM, cobrint297Llocs de resistència a les drogues; Deu tipus de tuberculosi de Mycobacterium i més que190Es van detectar tipus de NTM.
Taula 1: Informació de 18+6 fàrmacs+190+ntm
Avantatge del producte
Forta adaptabilitat clínica: les mostres d’esput es poden detectar directament amb l’agent d’autod -ifacció sense cultiu.
L’operació experimental és senzilla: la primera ronda d’operació d’amplificació és senzilla i la construcció de la biblioteca es completa en 3 hores, cosa que millora l’eficiència del treball.
Tipus integral i resistència als fàrmacs: cobrir els llocs d’escriptura i resistència als fàrmacs de MTB i NTM, que són els punts clau d’inquietud clínic, tipografia precisa i detecció de resistència als fàrmacs, donant suport a programari d’anàlisi independent i generant informes d’anàlisi amb un clic.
Compatibilitat: compatibilitat del producte, adaptant -se a les plataformes ILM i MGI/ONT.
Especificació del producte
Codi de producte | Nom del producte | Plataforma de detecció | especificacions |
HWTS-NGS-T001 | Tipus de micobacterium i kit de detecció de la resistència als fàrmacs (mètode d'amplificació multiplex) | ONT 、 Illumina 、 MGI 、 Salus Pro | 16/96rxn |
Posat: 23-2024 de gener